酵母蛋白小量提取試劑盒

一，試劑盒組份

二，說明

酵母蛋白小量提取試劑盒用于從酵母細胞中分提取可溶性各種蛋白。提取的蛋白可用于各種常規(guī)實驗。如PAGE，Western，免疫沉淀(immunol precipitation，IP)和免疫共沉淀(co-IP)。酵母裂解液中不含任何去污劑，可用各種方法測定蛋白含量。

三，操作步驟

1. 酵母常規(guī)培養(yǎng)。
2. 離心收集酵母。大概50－100ul的積壓體積。完全棄上清。
3. 加入酵母裂解液，吹打重重懸。再次離心，棄上清（此步的目的是將酵母洗一下，也可以省掉此步）。
4. 在酵母菌中，再加入0.5ml裂解液，加入5ul PMSF，5ulβ-巰基乙醇（好在通風處操作）。加入50mg左右的玻璃珠，預冷，渦流10min（每渦流1min，可以冰上冷卻1min）。
5. 離心，取上清。進行下一步實驗或者-70℃儲存。

三，注意事項

1，不同的酵母可能須渦流時間不同，可根據實際情況延長或者縮短時間。（比如蛋白濃度高低，蛋白降解情況等。）

2，如果一個月內能夠用完，可將β-巰基乙醇按照百分之一的量一次性全部加入酵母裂解液中。2－8度保存。

3，因為是采用物理方法破解酵母壁，所以對于酶等一些易失活蛋白可能并不適合。

4，為了你的實驗安全，請戴手套操作。并注意通風。