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一種重組克魯維酵母菌及其構(gòu)建方法和應(yīng)用 |
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| 本發(fā)明公開了一種重組克魯維酵母菌及其構(gòu)建方法和應(yīng)用。本發(fā)明是將乳酸克魯維酵母菌中的α-1,6-甘露糖轉(zhuǎn)移酶基因和/或α-1,3-甘露糖轉(zhuǎn)移酶基因滅活得到乳酸克魯維酵母菌株。本發(fā)明首先構(gòu)建重組載體,然后將重組載體導(dǎo)入克魯維酵母菌中獲得突變菌。本發(fā)明構(gòu)建的重組克魯維酵母菌有兩個(gè)特別明顯的優(yōu)點(diǎn):一是所敲除的酵母菌甘露糖轉(zhuǎn)移酶基因的編碼區(qū)80%以上缺失,不易產(chǎn)生回復(fù)突變,突變株穩(wěn)定性明顯高。二是本發(fā)明構(gòu)建的重組克魯維酵母菌表達(dá)的糖蛋白不存在過度糖基化現(xiàn)象。本發(fā)明的構(gòu)建重組克魯維酵母菌的方法,能成功高效的重組克魯維酵母,從8個(gè)克隆中即可得到4個(gè)陽性克隆,陽性率約50%。 |
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一種重組克魯維酵母菌及其構(gòu)建方法和應(yīng)用
一種重組克魯維酵母菌,是能作為表達(dá)如下低糖基化糖蛋白的宿主的重組菌,所述低糖基化糖蛋白的50%以上的N-糖鏈上的單糖數(shù)不大于20個(gè),較優(yōu)的是不大于16個(gè),最優(yōu)的是不大于11個(gè)的糖蛋白。
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| 專利號(hào): |
200810102232 |
| 申請(qǐng)日: |
2008年3月19日 |
| 公開/公告日: |
2008年10月15日 |
| 授權(quán)公告日: |
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| 申請(qǐng)人/專利權(quán)人: |
中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物工程研究所 |
| 國家/省市: |
北京(11) |
| 郵編: |
100071 |
| 發(fā)明/設(shè)計(jì)人: |
劉波、吳軍、馬清鈞、鞏新、唱韶紅 |
| 代理人: |
關(guān)暢 任鳳華 |
| 專利代理機(jī)構(gòu): |
北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司(11245) |
| 專利代理機(jī)構(gòu)地址: |
北京市西城區(qū)宣武門西大街甲129號(hào)金隅大廈602室(100031) |
| 專利類型: |
發(fā)明 |
| 公開號(hào): |
101285045 |
| 公告日: |
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| 授權(quán)日: |
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| 公告號(hào): |
000000000 |
| 優(yōu)先權(quán): |
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| 審批歷史: |
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| 附圖數(shù): |
4 |
| 頁數(shù): |
25 |
| 權(quán)利要求項(xiàng)數(shù): |
3 |
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